Вверх

Спорт-вики — википедия научного бодибилдинга

Изменения

Перейти к: навигация, поиск

Эктопический синтез белков (генотерапия)

197 байт добавлено, 10 лет назад
Эритропоэтин
=== Эритропоэтин ===
[[Image:Gud_5_6.jpg|300px|thumb|right|Рисунок 5.6. Регуляция экспрессии гена с помощью сиролимуса (рапамицина).]]
Недостаточность эритропоэтина обычно наблюдается при ХПН. Больным, находящимся на диализе, для поддержания достаточного гематокрита необходимы частые инъекции эпоэтинов. Основной недостаток такого лечения — его высокая стоимость. В экспериментах показана возможность индукции эктопического синтеза эритропоэтина в скелетных мышцах (Tripathy et al., 1996) или коже (Klinman et al., 1999). Для этого в/м или внутрикожно вводили плазмидную ДНК или вирусный вектор, содержащие ген эритропоэтина человека и активный промотор, например промотор сверхранних генов цитомегаловируса. У экспериментальных животных на протяжении нескольких месяцев после инъекции были повышены сывороточная концентрация эритропоэтина и гематокрит.
В норме секреция эритропоэтина почками жестко регулируется, поэтому желательно контролировать и эктопический синтез этого белка. Такая система регуляции (рис. 5.6) была разработана на основе искусственного фактора транскрипции, регулируемого сиролимусом (ра-памицином) (Ye et al., 1999). Сиролимус — это иммунодепрессант для приема внутрь (гл. 53), взаимодействующий с двумя белками: РК506-связывающим белком-12 (FKBP12) и РКВР12-рапамицин-ассоциированным белком. Индуцируемая система экспрессии эритропоэтина содержит три молекулярных компонента: 1) химерный белок, состоящий из активирующего транскрипцию участка р65-субъединицы фактора транскрипции NFkB и РКВР12-рапамицин-связывающего участка FKBP12-pa-памицин-ассоциированного белка, 2) химерный белок, состоящий из ДНК-связывающего участка и FKBP12, и 3) трансген, экспрессия которого регулируется искусственным фактором транскрипции. Сиролимус взаимодействует с FKBP12 и с РКВР12-рапамицин-связывающим участком и тем самым связывает первый химерный белок со вторым — образуется активный фактор транскрипции, который дозозависимо стимулирует экспрессию трансгена. Синтез эритропоэтина в скелетных мышцах происходит только в присутствии сиролимуса, который можно принимать внутрь. Этот подход использовали в экспериментах на мышах с нормальным иммунитетом и на макаках-резус, которым в/м вводили два адено-ассоциированных вектора, кодирующих различные компоненты системы.
Рисунок '''''Описание к рисунок 5.6. ''' Регуляция экспрессии гена с помощью сиролимуса (рапамицина). В верхней части рисунка показаны: 1) вектор, содержащий нужный трансген, транскрипция которого контролируется промотором, 2) химерный белок, состоящий из ДН К-связывающего участка фактора транскрипции и FKBP12 (см. текст), 3) химерный белок, состоящий из активирующего транскрипцию участка фактора транскрипции и FKBP12-pana-мицинpanaмицин-связывающего участка РКВР12-рапамицин-ассоцииро-ванного ассоциированного белка (см. текст), 4) сиролимус. Сиролимус обеспечивает сборку фактора транскрипции, который активирует РНК-по-лимеразу полимеразу и запускает транскрипцию. FRB — РКВР12-рапами-цинрапамицин-связывающий участок РКВР12-рапамицин-ассоциирован-ного ассоциированного белка.''
=== Другие факторы роста и гормоны ===

Навигация