Вверх

Спорт-вики — википедия научного бодибилдинга

Изменения

Перейти к: навигация, поиск

N-холинорецепторы

159 байт добавлено, 10 лет назад
Строение N-холинорецепторов
=== Строение N-холинорецепторов ===
[[Image:Gud_9_1.jpg|300px|thumb|right|Рисунок 9.1. Строение N-холинорецептора. ]]
N-холинорецепторы электрических органов и скелетных мышц представляют собой пентамерные структуры, образованные четырьмя типами субъединиц (аα; 3β; у γ либо бε; 5δ) в соотношении а2Ру8 α<sub>2</sub>βγδ (в эмбриональных или денервированных мышцах) или сс2Рб5 α<sub>2</sub>βεδ (в иннервированных мышцах взрослых особей). Степень гомологии аминокислотных последовательностей между разными типами субъединиц достигает 40%, что позволяет предположить их общее происхождение (Numa etal., 1983).
N-холинорецепторы стали классической моделью для изучения ионотропных рецепторов (хемочувствительных каналов, рецепторов-каналов). К этой группе принадлежат также рецепторы тормозных аминокислотных медиаторов (ГАМК и глицина), 5-НТ3-рецепторы и некоторые другие. Все они представляют собой пентамеры, состоящие из гомологичных субъединиц с молекулярной массой порядка 40 000—60 000 каждая. Внеклеточные домены каждой субъединицы состоят из 210 N-конце-вых аминокислот. Затем следуют 4 трансмембранных домена, причем на участок между 3-м и 4-м доменами приходится почти вся внутриклеточная часть субъединицы (рис. 9.1).
Рисунок '''''Описание к рис. 9.1. ''' Строение N-холинорецептора. А. Схема рецептора, воссозданная на основании данных, представленных на Б и В. Продольный срез; субъединица у удалена; остальные четыре субъединицы (две а, р и 6) образуют канал с широкой входной частью и сужением в глубине мембраны. Внутреннюю стенку канала образуют слегка выпуклые а-спиральные структуры вторых трансмембранных доменов (М, на Г) всех пяти субъединиц. Участки связывания лиганда (указаны белыми стрелками) располагаются на стыках субъединиц ау и аб (последний прикрыт субъединицей а). Б. Карта электронной плотности молекул рецептора (продольный срез). Стрелками указаны вход в канал и участок связывания лиганда. Область повышенной электронной плотности с цитоплазматической стороны рецептора соответствует связанному с этим рецептором якорному белку. В. Такая же карта, но для поперечного среза (30 ангстрем над поверхностью мембраны). Стрелками указаны предполагаемые пути подхода лиганда к участкам связывания (звездочки). Г. Линейная структура субъединиц разнш рецепторов, связанных с каналами. Видно значительное сходство между разными субъединицами. В каждом случае внеклеточный домен состоит из 210 N-концевых аминокислот, затем следуют 4 гидрофобных трансмембранных домена (М,—М4) и небольшая С-концевая внеклеточная последовательность. Домен М:, формирующий внутреннюю стенку канала, имеет а-спиральную структуру. У всех субьединш имеется дисульфидный мостик между аминокислотами в положениях 128 и 142, а у субъединиц а — еще и между Цис|И и Цис . Umwin. 1993.''
Все 5 субъединиц, каждая из которых имеет внеклеточную и внутриклеточную части, соединяются наподобие лепестков тюльпана, образуя круговую структуру с порой — каналом (Unwin, 1993; Karlin and Akabas, 1995; Changeux and Edelstein, 1998). Сам рецептор представляет собой асимметричный белковый комплекс с размерами 14 х 8 нм и молекулярной массой около 250 ООО. Его внеклеточная часть значительно больше внутриклеточной. В области постсинаптической мембраны (в нервно-мышечном синапсе, на вентральной поверхности электрических органов) N-холинорецепторы располагаются равномерно и с очень высокой плотностью (10 000/мкм2). Эго позвалило реконструировать их строение на основании электронной микроскопии с высоким разрешением — 10 ангстрем и менее (Unwin, 1993; Miyazawa et al., 1999) (рис. 9.1).
Участки связывания лигандов располагаются в области стыков субъединиц. В N-холинорецепторе имеются 5 таких стыков, однако в скелетных мышцах только 2 из них (ау αγ и а8αδ) образуют участки связывания. Специфичность по отношению к лигандам определяется обеими субъединицами, участвующими образовании такого участка (Taylor et al., 2000). Связывание стимуляторов, обратимых конкурентных блокаторов и а-нейротоксинов носит взаимоисключающий характер — видимо зоны их присоединения перекрываются.
Измерения электропроводимости связанных с N-холинорецепторами каналов показали, что скорость движения ионов по ним (5-107 с ') слишком высока для того, чтобы это движение можно было объяснить работой переносчика—очевидно, ионы движутся по открытому каналу простой диффузией. Вызванные стимуляторами изменения ионных потоков (входящий ток натрия, в меньшей степени — кальция) оказались обусловленными открыванием канала, непосредственно образованного белковым комплексом N-холинорецептора. Выяснилось, что внутренняя стенка этого канала формируется вторыми трансмембранными доменами всех пяти субъединиц. Участок связывания лигандов тесно связан с каналом; в скелетной мышце одновременное присоединение двух молекул стимулятора приводит к быстрому конформационному изменению и открыванию канала. Подробно свойства канала были изучены в электрофизиологических опытах с локальной фиксацией — методикой, позволяющей регистрировать открывание и закрывание одиночных ионных каналов (Sakmann, 1992).
Были выявлены гены, кодирующие субъединицы N-холино-рецепторов высших позвоночных, — сначала в скелетных мышцах, а затем в нейронах. Оказалось, что нейрональные N-холинорецепторы (в вегетативных ганглиях и ЦНС) также представляют собой пентамеры из 1—3 типов субъединиц. В скелетных мышцах имеется только по одному подтипу субъединиц а α (а1 α1 и β1), а в нейронах — 8 подтипов субъединиц а (а2—сцα2—α9) и 3 подтипа субъединиц β (β2—β4). Не все сочетания этих субъединиц образуют функционирующие рецепторы, но тем не менее число рецепторов слишком велико для того, чтобы их можно было различать на основании избирательного связывания лигандов. Различия в избирательной проницаемости связанных с рецепторами каналов для Na+ и Са могут свидетельствовать о том, что некоторые подтипы N-холинорецепторов могут участвовать не только в быстрой передаче сигналов через синапс, но выполнять также некие другие функции. Недавно было показано, что некоторые врожденные миастенические синдромы обусловлены мутациями субъединиц мышечных N-холинорецепторов, а некоторые варианты эпилепсии — мутациями субъединиц нейрональных N-холинорецепторов (Engel et al., 1998; Lindstrom, 2000).

Навигация