4702
правки
Спорт-вики — википедия научного бодибилдинга
Изменения
Новая страница: «== Разработка методики количественного определения глицина в таблетках == С целью подтве…»
== Разработка методики количественного определения глицина в таблетках ==
С целью подтверждения возможности использования реакции а-аминокислот с 0,2 % водным раствором нингидрина в количественном анализе нами проведено количественное определение глицина в таблетках.
В соответствии с ФСП на глицин таблетки сублингвальные 0,1 г одна таблетка имеет состав:
*Глицин 0,1
*Метилцеллюлоза водорастворимая (марки МЦ 100) 0,001
*Магния стеарат 0,001
*Масса таблетки 0,102 г
Для количественного анализа 0,1 г (точная навеска) порошка из 20 растертых таблеток, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в горячей воде, после охлаждения раствор доводят водой до метки и фильтруют через стеклянный фильтр № 3. При этом из раствора удаляют магния стеарат, снижающий интенсивность светопоглощения продукта нингидриновой реакции и, как следствие - воспроизводимость результатов анализа.
При приготовлении раствора глицина из таблеток в него, наряду с основным веществом (глицином), переходит водорастворимая метилцеллюлоза. Поэтому нами были изучены спектральные характеристики 0,1 % раствора метилцелпюлозы в условиях проведения реакции с водным раствором нингидрина: к 1 мл 0,1 % раствора метилцелпюлозы прибавляли 1,1 мл 0,2 % водного раствора нингидрина. Полученную смесь нагревают при температуре 120 °С в течение 20 мин, после чего продукт реакции разбавляют водой до 100 мл и, спустя 1 ч после начала реакции, определяли оптическую плотность исследуемого образца при длине волны 400 нм.
Установлено, что метилцеллюлоза в условиях проведения реакции не поглощает при длине волны 400 нм, а значит, её присутствие в растворе а-аминокислот не влияет на ход реакции с водным раствором нингидрина.
На этом основании нами предложена следующая методика проведения количественного анализа: к 1 мл полученного из навески таблеток глицина раствора прибавляют 1,1 мл 0,2 % водного раствора нингидрина и нагревают при температуре 120 °С в течение 20 мин. После полного охлаждения продукт разбавляют водой до 100 мл и через 1 ч после начала реакции определяют оптическую плотность при длине волны 400 нм на спектрофотометре в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм.
Параллельно проводят реакцию свежеприготовленного 0,1 % раствора стандартного образца глицина с 0,2 % водным раствором нингидрина и определяют оптическую плотность в аналогичных условиях. Стандартный образец глицина получен многократной дробной кристаллизацией фармакопейного глицина из водно-этанольной смеси.
Содержание глицина в таблетках (X), % вычисляют по формуле:
Dx - оптическая плотность продукта реакции 0,1 % раствора глицина, приготовленного из таблеток, с 0,2 % водным раствором нингидрина;
D0 - оптическая плотность продукта реакции 0,1 % раствора стандартного образца глицина с 0,2 % водным раствором нингидрина;
m0 и mх - средние массы навесок стандартного образца глицина и глицина из растёртых таблеток, соответственно, г;
W- остаточная влажность субстанции стандартного образца глицина (0,1 %); На основании проведённых шести параллельных испытаний получены результаты, которые приведены в таблице 9.
'''Таблица 9. Результаты количественного определения глицина в таблетках'''
<table cellpadding="7" border="1">
<tr><td rowspan="2">
<p>№</p>
<p>эксперимента</p></td><td rowspan="2">
<p>Навеска глицина в растертых таблетках, г</p></td><td rowspan="2">
<p>Навеска стандартно го глицина, г</p></td><td colspan="2">
<p>Оптическая плотность при X = 400 нм продукта реакции</p></td><td rowspan="2">
<p>Содержание глицина в таблетках, %</p></td></tr>
<tr><td>
<p>глицина из таблеток</p></td><td>
<p>Стандартного</p>
<p>глицина</p></td></tr>
<tr><td>
<p>1</p></td><td>
<p>0,00098</p></td><td>
<p>0,00099</p></td><td>
<p>0,45</p></td><td>
<p>0,46626</p></td><td>
<p>97,4</p></td></tr>
<tr><td>
<p>2</p></td><td>
<p>0,00099</p></td><td>
<p>0,000995</p></td><td>
<p>0,4545</p></td><td>
<p>0,46188</p></td><td>
<p>98,8</p></td></tr>
<tr><td>
<p>3</p></td><td>
<p>0,000994</p></td><td>
<p>0,00101</p></td><td>
<p>0,45655</p></td><td>
<p>0,46717</p></td><td>
<p>99,2</p></td></tr>
<tr><td>
<p>4</p></td><td>
<p>0,00099</p></td><td>
<p>0,001</p></td><td>
<p>0,45879</p></td><td>
<p>0,46552</p></td><td>
<p>99,45</p></td></tr>
<tr><td>
<p>5</p></td><td>
<p>0,000995</p></td><td>
<p>0,00102</p></td><td>
<p>0,45941</p></td><td>
<p>0,4719</p></td><td>
<p>99,7</p></td></tr>
<tr><td>
<p>6</p></td><td>
<p>0,001</p></td><td>
<p>0,00103</p></td><td>
<p>0,45745</p></td><td>
<p>0,46976</p></td><td>
<p>100,2</p></td></tr>
</table>
Нами проведена статистическая обработка результатов количественного определения глицина в таблетках в соответствии с ГФ XI (табл. 10).
'''Таблица 10. Статистическая обработка результатов количественного определения глицина в таблетках'''
<table cellpadding="7" border="1">
<tr><td>
<p>f</p></td><td>
<p><х>, %</p></td><td>
<p>s<sup>2</sup>*</p></td><td>
<p>S</p></td><td>
<p>Р,%</p></td><td>
<p>t(P,f)</p></td><td>
<p>t„bI4(P,f)</p></td><td>
<p>Ах</p></td><td>
<p>€,%</p></td></tr>
<tr><td>
<p>5</p></td><td>
<p>99,13</p></td><td>
<p>0,93575</p></td><td>
<p>0,9673</p></td><td>
<p>95</p></td><td>
<p>2,57</p></td><td>
<p>2,2</p></td><td>
<p>2,49</p></td><td>
<p>2,51</p></td></tr>
</table>
В соответствии с ФСП допустимые нормы отклонений в количественном содержании глицина в таблетках составляют ±10 %. На основании данных таблицы 10 видно, что все полученные результаты соответствуют допустимым нормам отклонений, а среднее значение количественного содержания глицина в таблетках составляет 99,13 %, что говорит о достаточно высокой точности метода. Кроме того, разработанный метод характеризуется достаточно высокой воспроизводимостью, относительная ошибка результата отдельного определения составила ±2,51 %. Метод не требует дорогостоящего оборудования и реактивов и доступен для большинства лабораторий, что обуславливает перспективность его использования в количественном анализе a-аминокислот в лекарственных препаратах.
С целью подтверждения возможности использования реакции а-аминокислот с 0,2 % водным раствором нингидрина в количественном анализе нами проведено количественное определение глицина в таблетках.
В соответствии с ФСП на глицин таблетки сублингвальные 0,1 г одна таблетка имеет состав:
*Глицин 0,1
*Метилцеллюлоза водорастворимая (марки МЦ 100) 0,001
*Магния стеарат 0,001
*Масса таблетки 0,102 г
Для количественного анализа 0,1 г (точная навеска) порошка из 20 растертых таблеток, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в горячей воде, после охлаждения раствор доводят водой до метки и фильтруют через стеклянный фильтр № 3. При этом из раствора удаляют магния стеарат, снижающий интенсивность светопоглощения продукта нингидриновой реакции и, как следствие - воспроизводимость результатов анализа.
При приготовлении раствора глицина из таблеток в него, наряду с основным веществом (глицином), переходит водорастворимая метилцеллюлоза. Поэтому нами были изучены спектральные характеристики 0,1 % раствора метилцелпюлозы в условиях проведения реакции с водным раствором нингидрина: к 1 мл 0,1 % раствора метилцелпюлозы прибавляли 1,1 мл 0,2 % водного раствора нингидрина. Полученную смесь нагревают при температуре 120 °С в течение 20 мин, после чего продукт реакции разбавляют водой до 100 мл и, спустя 1 ч после начала реакции, определяли оптическую плотность исследуемого образца при длине волны 400 нм.
Установлено, что метилцеллюлоза в условиях проведения реакции не поглощает при длине волны 400 нм, а значит, её присутствие в растворе а-аминокислот не влияет на ход реакции с водным раствором нингидрина.
На этом основании нами предложена следующая методика проведения количественного анализа: к 1 мл полученного из навески таблеток глицина раствора прибавляют 1,1 мл 0,2 % водного раствора нингидрина и нагревают при температуре 120 °С в течение 20 мин. После полного охлаждения продукт разбавляют водой до 100 мл и через 1 ч после начала реакции определяют оптическую плотность при длине волны 400 нм на спектрофотометре в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм.
Параллельно проводят реакцию свежеприготовленного 0,1 % раствора стандартного образца глицина с 0,2 % водным раствором нингидрина и определяют оптическую плотность в аналогичных условиях. Стандартный образец глицина получен многократной дробной кристаллизацией фармакопейного глицина из водно-этанольной смеси.
Содержание глицина в таблетках (X), % вычисляют по формуле:
Dx - оптическая плотность продукта реакции 0,1 % раствора глицина, приготовленного из таблеток, с 0,2 % водным раствором нингидрина;
D0 - оптическая плотность продукта реакции 0,1 % раствора стандартного образца глицина с 0,2 % водным раствором нингидрина;
m0 и mх - средние массы навесок стандартного образца глицина и глицина из растёртых таблеток, соответственно, г;
W- остаточная влажность субстанции стандартного образца глицина (0,1 %); На основании проведённых шести параллельных испытаний получены результаты, которые приведены в таблице 9.
'''Таблица 9. Результаты количественного определения глицина в таблетках'''
<table cellpadding="7" border="1">
<tr><td rowspan="2">
<p>№</p>
<p>эксперимента</p></td><td rowspan="2">
<p>Навеска глицина в растертых таблетках, г</p></td><td rowspan="2">
<p>Навеска стандартно го глицина, г</p></td><td colspan="2">
<p>Оптическая плотность при X = 400 нм продукта реакции</p></td><td rowspan="2">
<p>Содержание глицина в таблетках, %</p></td></tr>
<tr><td>
<p>глицина из таблеток</p></td><td>
<p>Стандартного</p>
<p>глицина</p></td></tr>
<tr><td>
<p>1</p></td><td>
<p>0,00098</p></td><td>
<p>0,00099</p></td><td>
<p>0,45</p></td><td>
<p>0,46626</p></td><td>
<p>97,4</p></td></tr>
<tr><td>
<p>2</p></td><td>
<p>0,00099</p></td><td>
<p>0,000995</p></td><td>
<p>0,4545</p></td><td>
<p>0,46188</p></td><td>
<p>98,8</p></td></tr>
<tr><td>
<p>3</p></td><td>
<p>0,000994</p></td><td>
<p>0,00101</p></td><td>
<p>0,45655</p></td><td>
<p>0,46717</p></td><td>
<p>99,2</p></td></tr>
<tr><td>
<p>4</p></td><td>
<p>0,00099</p></td><td>
<p>0,001</p></td><td>
<p>0,45879</p></td><td>
<p>0,46552</p></td><td>
<p>99,45</p></td></tr>
<tr><td>
<p>5</p></td><td>
<p>0,000995</p></td><td>
<p>0,00102</p></td><td>
<p>0,45941</p></td><td>
<p>0,4719</p></td><td>
<p>99,7</p></td></tr>
<tr><td>
<p>6</p></td><td>
<p>0,001</p></td><td>
<p>0,00103</p></td><td>
<p>0,45745</p></td><td>
<p>0,46976</p></td><td>
<p>100,2</p></td></tr>
</table>
Нами проведена статистическая обработка результатов количественного определения глицина в таблетках в соответствии с ГФ XI (табл. 10).
'''Таблица 10. Статистическая обработка результатов количественного определения глицина в таблетках'''
<table cellpadding="7" border="1">
<tr><td>
<p>f</p></td><td>
<p><х>, %</p></td><td>
<p>s<sup>2</sup>*</p></td><td>
<p>S</p></td><td>
<p>Р,%</p></td><td>
<p>t(P,f)</p></td><td>
<p>t„bI4(P,f)</p></td><td>
<p>Ах</p></td><td>
<p>€,%</p></td></tr>
<tr><td>
<p>5</p></td><td>
<p>99,13</p></td><td>
<p>0,93575</p></td><td>
<p>0,9673</p></td><td>
<p>95</p></td><td>
<p>2,57</p></td><td>
<p>2,2</p></td><td>
<p>2,49</p></td><td>
<p>2,51</p></td></tr>
</table>
В соответствии с ФСП допустимые нормы отклонений в количественном содержании глицина в таблетках составляют ±10 %. На основании данных таблицы 10 видно, что все полученные результаты соответствуют допустимым нормам отклонений, а среднее значение количественного содержания глицина в таблетках составляет 99,13 %, что говорит о достаточно высокой точности метода. Кроме того, разработанный метод характеризуется достаточно высокой воспроизводимостью, относительная ошибка результата отдельного определения составила ±2,51 %. Метод не требует дорогостоящего оборудования и реактивов и доступен для большинства лабораторий, что обуславливает перспективность его использования в количественном анализе a-аминокислот в лекарственных препаратах.
